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工具酶系列

工具酶种类繁多、功能各异,主要包括限制酶、聚合酶、连接酶、修饰酶和核酸酶五大类。 这些酶具有特异性的序列识别能力以及高效的生物催化活性,在一定的条件下可以对核酸分子进行切割、连接、扩增以及修饰等,同时工具酶的反应条件温和且具有出色的生物相容性。

导 航
T4 DNA Ligase 酶
服务项目

T4 DNA Ligase Protease (T4 DNA连接酶)

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产品说明:

T4 DNA ligase,也称为T4连接酶,能够将粘性末端或平末端双链DNA或RNA的5'-P末端和3'-OH末端之间形成磷酸二酯键。同时,T4 DNA ligase也可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA复合物上的单链缺口,但对于单链核酸没有活性。在进行酶连接反应时,T4 DNA ligase需要ATP作为辅助因子本公司T4 DNA连接酶是重组表达,并经多步纯化制备的重组蛋白

 

活性定义:

20 μL 的连接反应体系中, 6 μg 的 λDNA-Hind Ⅲ分解物在 16℃下反应 30 min 时, 催化 50%以上的 DNA 片段发生连接所 需要的酶量定义为 1 个活性单位(U)。

 

活性测定条件:

50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃) 1 mM ATP10 mM MgCl210 mM DTT16℃ 温育,推荐DNA 5´末端浓度为 0.1-1.0 uM

 

浓度400U/μl

保存条件: 冰袋运输。 -20℃保存,有效期 2 年。

 

特点与应用

限制性内切酶克隆

高效连接粘性末端和平末端

T/A 克隆

构建高丰度克隆文库

RNA  DNA 的连接 

双链DNARNA   DNA/RNA的单链切刻修复等

 

酶贮存缓冲液

10 mM Tris-HCl5mM KCl,1 mM DTT0.1 mM EDTA 50% GlycerolpH 7.4 @ 25°C 

 

应用体系距离:

组份

体积/ul

载体 DNA

50- 100 ng

插入片段

片段与载体的分子摩尔比应在 3:1-5:1

10 × Ligase Buffer

2 µL

Hieff® Gold T4 DNA Ligase (5 U/µL)

1 µL

ddH2O

To 20 µL

 

注意事项 

1)Buffer 在融解时,如果出现少量沉淀属正常现象,请颠倒混匀后使用。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3)本产品仅作科研用途!

 

样品信息:

image.png 

 

所有产品仅用作科学研究或药证申报,我们不为任何个人用途提供产品和服务。

技术咨询电话: 13522791889

官方网站: http://www.aiprotein-taiji.com

邮箱: machangxing@pku.org.cn

地址中国(四川)自由贸易试验区成都市天府新区兴隆街道湖畔路东段733


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