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工具酶系列

工具酶种类繁多、功能各异,主要包括限制酶、聚合酶、连接酶、修饰酶和核酸酶五大类。 这些酶具有特异性的序列识别能力以及高效的生物催化活性,在一定的条件下可以对核酸分子进行切割、连接、扩增以及修饰等,同时工具酶的反应条件温和且具有出色的生物相容性。

导 航
重组羧肽酶 B
服务项目

重组羧肽酶BRecombinant Carboxypeptidase B

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产品说明:

重组羧肽酶B是一种Zn2+-金属蛋白酶,催化多肽中碱性氨基酸L-Lys和L-Arg从C端位置水解。分子量为33.8kD,等电点为6.0,最适pH为7.5-9.0。羧肽酶B的活性受精氨酸、赖氨酸竞争性抑制,金属离子螯合剂如EDTA等可以抑制酶活性。四川肽极生物的重组羧肽酶B是由大肠杆菌表达生产,氨基酸序列与大鼠胰腺羧肽酶B完全一致,具有与动物源性羧肽酶B相同的酶学性质,可用于各种生物技术过程中替代动物源性羧肽酶B。羧肽酶B的最适pH为8.0,偏酸或偏碱均会造成活性下降,pH接近5.0时活性接近零,pH>12.0时活性完全丧失。羧肽酶B在一定温度内(<60℃)活性随温度升高而上升但是也需要兼顾蛋白本身性质。

活性定义:

25℃,pH7.6,1min催化1μmol马脲酰-L-精氨酸水解的酶量为一个酶活单位。

活性测定条件:

用无菌水或者25mM Tris-HCl (pH7.6)溶解重组羧肽酶B,使酶液浓度为1-10mg/ml; 酶量:目的蛋白(w:w)=1:50-1:1000,最适pH为7.5-9.0。

浓度:≥170 units/mg pro.

保存条件: 

重组羧肽酶B冻干粉存储于2-8℃,24个月稳定;用无菌水或者25mM Tris-HCl (pH 7.6)溶解后存于-20℃,反复冻融10次建议分装储存,无活性损失。


特点与应用

无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料。
质量稳定:批量生产,可保证稳定连续的批次生产;产品批次间无差异,质量稳定。
纯度高:比活高;宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。
冻干粉:易于储存和运输。

 

酶贮存缓冲液

用无菌水或者25mM Tris-HCl(pH 7.6)50%glycerol
 

应用体系距离:

组份

体积/ul

目标蛋白

10ug

10XSUMO Buffer

10ul

重组羧肽酶B(0.17U/ul)

2ul

ddH2O

Variable

总体积

100ul

 

注意事项: 

1、为达到最好的酶切效果,请确保酶切反应中重组目标蛋白为部分或完全纯化的蛋白。

2、对于大部分目标蛋白,为达到较好的酶切效果,重组羧肽酶B 蛋白酶可在 NaCl 浓度为 100mM 的反应液中进行反应。如有需要,可根据实际情况在 50mM-150mM 之间调节 NaCl 的浓度以达到理想效果。切记实验中一定要考虑酶及融合蛋白中的盐离子浓度。

3、保持咪唑浓度低于 100mM,若高于 1000mM 会影响 羧肽酶B 蛋白酶 的活性。

 

样品信息:

 

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所有产品仅用作科学研究或药证申报,我们不为任何个人用途提供产品和服务。

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