3C Protease (3C蛋白酶)
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100U | ￥380 | |
1000U | ￥1520 | |
1000U*2 | ￥4940 |
产品说明:
C蛋白酶是切割小RNA病毒科非结构蛋白的关键酶，在病毒复制过程中发挥着重要作用，能特异切割含有3C酶切位点的融合蛋白，具有良好的生物学活性。本酶是高纯度的N端6×His-GST标签蛋白质，通过镍柱或GST树脂结合方法极易从蛋白酶反应液中去除。鼻病毒属于小RNA病毒科，其中的人鼻病毒3C蛋白酶基因编码区全长552bp，编码的蛋白质相对分子质量约为22000 Da。人鼻病毒3C蛋白酶具有高度的酶切特异性，能特异切割位于Gln-Gly之间的肽键，识别位点为 LEVLFQ/GP 。3C蛋白酶在4-30℃温度条件下，都可以有较高的酶切活性。但4度酶切效果最佳，在偏中的 pH条下具有活性。
本公司生产的3C蛋白酶含有His标签，酶切后，可通过Ni-NTA Resin亲和纯化，His标签保证了，3C蛋白酶高亲和力的结合Ni-NTA，以最大限度的去除3C蛋白酶。该3C蛋白酶分子量约22kD。本公司Precission 3C protease是重组表达，并经多步纯化制备的重组蛋白。
酶切条件：50 mM Tris-HCl，150 mM NaCl，1 mM EDTA，1 mM DTT，pH7.0， 25℃
活性定义:
1活性单位指在4℃下，1× Precission 3C protease反应缓冲体系下，16 h内切割大于95%的100ug Sumo-3C-SSB融合蛋白底物所需的酶量。
活性测定条件:
50mM Tris-HCL(pH7. 8)，150 mM NaCl, 1 mM DTT中，30°C温育0.5-1h。
浓度：2U/ml
保存条件： -20°C
特点与应用
1、识别切断蛋白中的LEVLFQ↓GP序列，去除标签序列等
2、4℃活性最高，有利于保持目标蛋白的稳定性和活性
3、具有His标签，可以方便的从反应体系中去除3C蛋白酶
酶贮存缓冲液
50 mM Tris-HCl (pH8.0，25℃)，150 mM NaCl，1 mM EDTA，0.5 mM，Tris (Hydroxypropyl) Phosphine（THP)，50% Glycerol
反应体系：
组份 | 体积/ul |
融合蛋白底物 | 20-30ug |
10X Buffer | 5ul |
3C Protease（5U/ul） | 1-2ul |
ddH2O | Variable |
总体积 | 50ul |
注意事项
1、为达到最好的酶切效果，请确保酶切反应中重组融合蛋白为部分或完全纯化的蛋白。
2、对于大部分融合蛋白，为达到较好的酶切效果，3C蛋白酶可在 NaCl 浓度为300 mM 的反应液中进行反应。如有需要，可根据实际情况在 100mM-300mM 之间调节 NaCl 的浓度以达到理想效果。切记实验中一定要考虑酶及融合蛋白中的盐离子浓度。
3、保持咪唑浓度低于 300mM，若高于 300mM 会影响 3C蛋白酶的活性。
样品信息：
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