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工具酶系列

工具酶种类繁多、功能各异,主要包括限制酶、聚合酶、连接酶、修饰酶和核酸酶五大类。 这些酶具有特异性的序列识别能力以及高效的生物催化活性,在一定的条件下可以对核酸分子进行切割、连接、扩增以及修饰等,同时工具酶的反应条件温和且具有出色的生物相容性。

导 航
SUMO 蛋白酶
服务项目

SUMO Protease (SUMO蛋白酶,亦称Ulp蛋白酶)

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产品说明:

SUMO Protease (SUMO蛋白酶,亦称Ulp蛋白酶),是一种具有较高活性的半胱氨酸蛋白酶,来源于酵母编码的MIP1基因,其特异性识别UBL蛋白的三级结构-SUMO(Small Ubiquitin-Like Modifier)。SUMO蛋白酶能够识别完整的SUMO序列,并依赖正确的蛋白质构象,仅有完整的序列,没有正确的结构,SUMO酶是不能对目标蛋白进行切割的。因此,SUMO Protease 酶切的最适温度为30°C,该酶在较宽的温度(4°C -30°C)和PH(PH7.0-9.0)范围内均有活性。SUMO蛋白酶带有多聚His标签,酶切后,可采用亲和层析的方法很容易的将SUMO去除。

SUMO蛋白酶的识别序列如下,切割位点位于QIGG之后SDSEVNQEAKPEVKPEVKPETHINLKVSDGSSEIFFKIKKTTPLRRLMEAFAKRQGKEMDSLRFLYDGIRIQADQTPED

LDMEDNDIIEAHREQIGG

本公司生产的SUMO蛋白酶含有双His标签,酶切后,可通过Ni-NTA Resin亲和纯化,很容易地将SUMO去除;双His标签保证了,SUMO蛋白酶高亲和力的结合Ni-NTA,以最大限度的去除SUMO蛋白酶。该SUMO蛋白酶分子量约26kD。

SUMO Protease 酶切的最适温度为30°C,该酶在较宽的温度(4°C -30°C)和PH(PH7.0-9.0)范围内均有活性。SUMO蛋白酶带有多聚His标签,酶切后,可采用亲和层析的方法很容易的将SUMO去除。

活性定义:

30°C条件下反应1h,能够切割85%以上的2ug反应底物所需要的酶量定义为1个活性单位。

活性测定条件:

50mM Tris-HCL(pH7. 8),150 mM NaCl, 1 mM DTT中,30°C温育0.5-1h。

 

浓度:10U/μl

保存条件: -20°C 

 

特点与应用

1、带有多聚His标签,酶切后,可采用亲和层析的方法去除。

2、切除SUMO标签融合蛋白上的SUMO标签,获得无标签的目的蛋白

 

酶贮存缓冲液

25mMTris-HCl(pH8.0), 300mM NaCl,1 mM DTT,0.1% NP-40,50%glycerol

反应体系:

组份

体积/ul

sumo融合蛋白

10

10XSUMO Buffer(+salt)

10

SUMO Protease(10U/ul)

1

ddH2O

Variable

总体积

100


注意事项 

1、为达到最好的酶切效果,请确保酶切反应中重组融合蛋白为部分或完全纯化的蛋白。

2、对于大部分融合蛋白,为达到较好的酶切效果,SUMO 蛋白酶可在 NaCl 浓度为 150mM 的反应液中进行反应。如有需要,可根据实际情况在 100mM-300mM 之间调节 NaCl 的浓度以达到理想效果。切记实验中一定要考虑酶及融合蛋白中的盐离子浓度。

3、保持咪唑浓度低于 300mM,若高于 300mM 会影响 SUMO 蛋白酶的活性。

  

样品信息:

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